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摘要
目的：考察红花口服液(HOL)缓解神经病理性疼痛(NP)的药效作用特点并探究其分子作用机制。方法：基于脊神经结扎(SNL)大鼠模型，将健康雄性SD大鼠随机分为假手术组，模型组，HOL低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0 mL·kg-1·d-1)及阳性药普瑞巴林组(25 mg·kg-1·d-1)，每组6只。在脊神经结扎手术恢复3 d后，连续灌胃给药14 d并采集样本。期间检测各组大鼠的机械痛阈值和冷痛阈值，考察HOL的镇痛作用特点。将假手术组、模型组、HOL高剂量组的海马组织样本进行转录组测序，获取不同组别之间的差异表达基因，并进行通路富集分析，进而，选择与NP密切相关的靶标进行验证，进一步通过分子对接寻找HOL关键活性成分与靶标分子的具体结合位点。此外，检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)的表达水平，评价HOL对NP大鼠的影响。结果：与假手术组比较，模型组大鼠的机械痛阈值及冷痛阈值均明显降低(P<0.05)。与模型组比较，HOL组可有效升高其机械痛阈值及冷痛阈值(P<0.05)；转录组分析发现，模型组与假手术组比较共有376个差异表达基因，其中上调基因124个、下调基因252个，模型组与HOL组比较共有194个差异表达基因，其中上调基因33个、下调基因161个。其中，类胰岛素一号生长因子(IGF1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-14 (MMP-14)、酪氨酸激酶受体2(ERBB2)和整合素A5(ITGA5)与NP密切相关。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠海马中上述各分子的mRNA表达量均显著升高(P<0.01)。与模型组比较，HOL组可有效降低其mRNA表达量(P<0.01)。分子对接结果显示，红花主要活性成分羟基红花黄色素A、山奈酚和槲皮素与上述靶标分子IGF1、MMP-2、MMP-14、ERBB2、ITGA5的氨基酸残基形成稳定的氢键作用力。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠血清中TNF-α/IL-10表达失衡(P<0.01)，与模型组比较，HOL组可显著减少促炎细胞因子TNF-α的含量(P<0.01)，增加抗炎细胞因子IL-10的含量(P<0.05)。结论：HOL对SNL大鼠具有镇痛作用，其机制与抑制神经炎症密切相关。
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