干扰或过表达PDIA3对过氧化氢诱导的星形胶质细胞损伤的影响

作者：雷雨广; 徐继鹏; 陈超; 张伟丽

来源：中国老年学杂志, 2020, 40(03): 585-589.

• 蛋白质二硫键异构酶A3
• 星形胶质细胞
• p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路
• 氧化损伤

目的探讨干扰或过表达蛋白质二硫键异构酶(PDI)A3对过氧化氢诱导的星形胶质细胞损伤的影响及其作用机制。方法体外培养星形胶质细胞,构建PDIA3干扰及过表达载体稳定株系,采用过氧化氢(H2O2)诱导建立星形胶质细胞损伤模型。实验将星形胶质细胞分为对照组(NC组)、H2O2组、H2O2+si-con组、H2O2+si-PDIA3组、H2O2+pcDNA组、H2O2+pcDNA-PDIA3组。实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PDIA3 mRNA表达;Western印迹检测PDIA3及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路蛋白表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡。收集各组星形胶质培养基上清液检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平。结果与NC组相比,H2O2组星形胶质细胞中PDIA3 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);H2O2组细胞LDH释放量、TNF-α、IL-6水平、细胞凋亡率及p-p38蛋白表达均显著升高(P<0.05),干扰PDIA3表达后明显升高(P<0.05),PDIA3过表达后明显降低(P<0.05);H2O2组细胞存活率显著降低(P<0.05),干扰PDIA3表达后明显降低(P<0.05),PDIA3过表达后明显升高(P<0.05)。结论 PDIA3过表达可改善H2O2诱导的星形胶质细胞氧化应激及炎症损伤,其可能通过抑制p38MAPK信号通路激活而发挥作用。

• 单位
  信阳职业技术学院