鸡白细胞介素18基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：李新生; 尹红征; 陈红英; 邵攀峰; 王振亚; 宋亚鹏

来源：安徽农业大学学报, 2009, 36(04): 547-551.

DOI：10.13610/j.cnki.1672-352x.2009.04.030

• 鸡白细胞介素18
• 成熟蛋白
• 克隆
• 原核表达 chicken interleukin-18
• mature protein
• cloning
• prokaryotic expression

通过RT-PCR技术直接从罗曼鸡脾脏提取的总RNA中扩增鸡白细胞介素18(ChIL-18)全基因,并克隆和测序得到序列基因全长为597 bp的ChIL-18。将ChIL-18成熟蛋白编码区(510 bp)定向插入到原核表达载体pGEX-4T-1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,构建重组表达质粒pGEX-ChIL-18,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下可高效表达融合蛋白(GST-ChIL-18)。SDS-PAGE可检测到分子质量约为46 kDa的GST-ChIL-18。Western blot证实GST-ChIL-18能与鸡IL-18单克隆抗体发生特异性反应。融合蛋白GST-...

• 单位
  河南农业大学