阿卡斑病毒竞争ELISA抗体检测方法的建立和比较试验

作者：苗海生; 李乐; 廖德芳; 寇美玲; 朱建波; 肖雷; 孟锦昕; 杨恒; 李华春^*

来源：中国预防兽医学报, 2019, 41(04): 371-375.

DOI：10.3969/j.issn.1008-0589.201807015

• 阿卡斑病毒
• cELISA
• 抗体检测

为建立阿卡斑病毒抗体检测方法,本研究以纯化的阿卡斑病毒作为包被抗原,以制备的抗阿卡斑病毒的多克隆抗体与待检血清竞争结合抗原,采用方阵滴定法优化反应条件,建立了阿卡斑病毒竞争ELISA(cELISA)抗体检测方法。通过对60份牛、羊阿卡斑病毒抗体阳性血清和40份阴性血清样品的检测,确定阴阳性样品抑制率(PI)临界值为60%;特异性试验结果显示,该方法对BTV-1、BTV-4、BTV-9、BTV-16、小反刍兽疫、中山病病毒、鹿流行性出血热病毒(EHDV)、羊痘和O型、A型、Asia-1型口蹄疫病毒阳性血清无交叉反应;敏感性试验结果显示,标准阳性血清1∶128倍稀释时,检测结果仍为阳性,SNT最低检出为,敏感性高于微量血清中和试验(SNT)检测结果(1∶64);批内和批间变异系数(CV)在0.54%～5.27%和0. 3%～9.3%之间,具有较好的可重复性;用该方法与法国ID VET公司的同类试剂盒对85份牛、羊血清样品同时检测,结果显示二者符合率为91.76%,可以替代进口同类产品。本研究建立的检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可以用于阿卡斑病毒抗体检测和流行病学调查。

• 单位
  云南省畜牧兽医科学院