层粘连蛋白β-1在胃癌侵袭转移中的作用及其机制

作者：苑佳欣; 檀碧波^*; 李勇; 范立侨; 赵群; 刘庆伟; 刘文博; 张再博; 崔佳祥

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(08): 1508-1511.

• 胃癌
• 层粘连蛋白β-1
• 侵袭
• 转移
• RNA干扰技术

目的探讨层粘连蛋白β-1(LAMB1)在胃癌癌结节表达及在肿瘤侵袭迁移过程中作用及其机制。方法收集河北医科大学第四医院35例胃癌患者的胃癌根治术后的病理标本, 包括胃癌癌结节、原发灶及癌旁组织。以免疫组织化学(IHC)技术检测LAMB1蛋白在胃癌癌结节、原发灶及癌旁组织中的表达情况。荧光实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白印迹(Western blot)技术检测LAMB1 mRNA和蛋白在人胃癌细胞株AGS、MKN74及正常胃上皮细胞株GES-1中表达。合成抑制LAMB1的小干扰RNA(siRNA)并转染AGS细胞;噻唑蓝(MTT)法检测细胞的活性;划痕实验(Wound assay)和Transwell小室实验检测细胞的迁移侵袭能力;Western blot检测上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、波形蛋白(Vimentin)表达, 组间比较采用t检验。结果 LAMB1蛋白在胃癌癌结节、原发灶及癌旁组织中的强表达率分别为82.86%(29/35)、60.00%(21/35)、14.29%(5/35)(χ2=34.211, P<0.01)。AGS、MKN74、GES-1细胞LAMB1 mRNA表达水平为1.996±0.225、1.519±0.162、0.670±0.230, 差异有统计学意义(F=63.602, P<0.01);蛋白的表达水平为1.044±0.138、0.693±0.106、0.348±0.089, 差异有统计学意义(F=58.028, P<0.01)。LAMB1-siRNA转染后AGS细胞LAMB1 mRNA表达(0.345±0.092)明显低于对照组(1.066±0.149), 差异有统计学意义(t=10.085, P<0.01)。MTT结果显示LAMB1-siRNA转染组AGS经过24 h后细胞活性(0.491±0.097)低于对照组(0.751±0.090), 差异有统计学意义(t=4.813, P<0.01)。LAMB1-siRNA转染组AGS细胞迁移率[(37.017±6.043)%]明显低于对照组[(66.533±11.567)%], 差异有统计学意义(t=5.540, P<0.01);Transwell小室实验结果显示LAMB1-siRNA转染组侵袭细胞数[(57.667±10.152)个]明显低于对照组[(109.667±17.592)个], 差异有统计学意义(t=6.271, P<0.01)。LAMB1-siRNA转染组细胞MMP-2、N-cadherin、Vimentin蛋白表达(0.615±0.126、0.409±0.065、0.734±0.103)均低于对照组(1.117±0.115、1.032±0.128、1.115±0.101), 差异有统计学意义(t=5.097、7.517、4.575, P<0.05), 而E-cadherin表达水平(1.323±0.189)则高于对照组(0.817±0.139), 差异有统计学意义(t=-3.736, P<0.05)。结论 LAMB1在胃癌转移过程中水平增高, 可能是通过调控肿瘤细胞的EMT过程而参与了胃癌的进展转移。

• 单位
  河北医科大学第四医院