摘要
本研究以‘月月粉’叶片为外植体进行月季(Rosa chinensis cv. ‘Old Blush’)愈伤组织的诱导,再以诱导的胚性愈伤组织为材料进行细胞悬浮,以期建立一套稳定、高效的细胞悬浮培养体系。其结果表明:当叶片用3.0 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸(2, 4-dichlorophenoxyacetic acid, 2, 4-D)、0.5 mg/L噻苯隆(thidiazuron, TDZ)和2.0 mg/L 6-苄氨基腺嘌呤(6-benzylaminopurine, 6-BA)激素处理时,愈伤组织诱导效果最佳,且得到较多胚性愈伤组织。诱导过程中最佳的光照条件为黑暗处理,得到的胚性愈伤组织质地松软呈淡黄色,为细胞悬浮培养提供最适原材料。在细胞悬浮培养中,以1 g胚性愈伤组织接种到30 mL液体培养基并100 r/min振荡培养,悬浮培养的效果最好。最佳继代时间为15 d左右,增殖速率与增殖倍数都能达到较高值。该研究为月季体胚再生以及转基因技术提供科学依据,为培育或改良新品种提供一定的技术支撑。
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