H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及表达

作者：刘仁陆; 周佩娇; 朱事康; 任涛; 戴应基; 李炳清; 曹伟胜; 罗卓军; 程珏益; 郑世萍; 廖明

来源：中国兽医科技, 2005, (12): 942-945.

• 禽流感病毒
• H5N1亚型
• NS1基因
• 克隆
• 表达 AIV
• H5N1 subtype
• NS1 gene
• cloning
• expression

利用RT-PCR扩增了2株H5N1亚型禽流感病毒NS1基因,并将其克隆到pMD 18-T载体上,进行序列分析。结果显示,这2株禽流感病毒NS1基因核苷酸序列的同源性为70.2%,分别属于NS等位基因群A和等位基因群B。再将克隆的NS1基因插入到pET-28a质粒中构建原核表达载体,将其转化到DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞中,经双酶切鉴定及序列分析,表明获得了重组质粒pET-52NS1和pET-174NS1。经SDS-PAGE分析,重组质粒转化BL21(DE3)(pLysS)感受态细胞后,经IPTG诱导,获得了分子质量约为30 ku的NS1融合蛋白。用AIV多克隆血清做Western-blott...

• 单位
  中华人民共和国广东出入境检验检疫局; 华南农业大学; 惠州出入境检验检疫局