摘要
目的:从蛋白质及核酸水平研究伴肌动蛋白相关锚定蛋白(N-RAP)在颈椎后纵韧带骨化中的表达,探讨其存在的临床意义。方法:选择2006~2010年间行手术治疗的20例颈椎后纵韧带骨化症患者(OPLL组)及10例因外伤行颈椎手术患者(对照组)的颈椎后纵韧带标本。所有标本福尔马林固定、石蜡包埋,以N-RAP兔抗人多克隆抗体作为Ⅰ抗免疫组化SP法制片,DAB显色。选择染色满意的标本切片,观察表达N-RAP的细胞(棕黄染色)在两组样本中的数量及分布特点。5例骨化样本及5例对照样本冰浴匀浆、提取总RNA,行实时定量PCR检测。观测后纵韧带骨化症患者及对照病例后纵韧带组织中N-RAP mRNA的表达情况。结果:20例骨化韧带标本中,16例染色满意;10例对照组后纵韧带标本中,6例染色满意。免疫组化结果显示N-RAP表达于韧带组织中细胞的胞浆中,呈棕黄色染色。在OPLL组的后纵韧带组织中,可见多个黄染细胞及少量蓝色无NRAP表达的细胞。而在对照组后纵韧带中,仅可见蓝色无N-RAP表达的细胞。实时定量PCR检测发现N-RAP在对照组标本中平均表达量为14.29±4.70,在OPLL组标本中为161.29±60.14,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:颈椎OPLL韧带组织中存在较高水平的N-RAP,其可能参与了韧带骨化的发生、发展过程。
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单位中国人民解放军第二军医大学; 上海交通大学医学院附属新华医院; 长征医院