摘要
目的探讨白藜芦醇(Res)对低氧复氧(H/R)损伤心肌细胞的保护作用。方法采用三气培养箱法制备乳大鼠心肌细胞H/R损伤模型(H12 h/R12 h)。乳大鼠心肌细胞分为5组:细胞对照组、H/R模型组、模型+Res 5和20μmol·L-1组(Res预处理细胞12 h,然后H12 h/R12 h)和模型+Res 20μmol·L-1+氯喹(CQ)10μmol·L-1组(Res预处理细胞12 h,然后含CQ的培养基H12 h/R12 h);CCK-8法检测心肌细胞存活率,比色法测定心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,AnnexinⅤ/PI双染法检测细胞凋亡,免疫荧光法检测心肌细胞内微管相关蛋白1轻链3(LC3)阳性细胞率,Western印迹法检测心肌细胞Beclin 1,LC3Ⅱ和P62蛋白表达水平。结果与细胞对照组比较,H/R组心肌细胞存活率下降(P<0.01),细胞凋亡率和LDH漏出率上升(P<0.01),LC3阳性细胞率和Beclin 1表达水平无明显变化,LC3Ⅱ和P62表达水平下降(P<0.05)。与H/R组比较,Res 5和20μmol·L-1可升高心肌细胞存活率(P<0.05),降低凋亡率和LDH漏出率(P<0.01),LC3阳性细胞率增高(P<0.05),Beclin 1,LC3Ⅱ和P62蛋白表达水平增加(P<0.05)。与模型+Res20μmol·L-1组比较,加用CQ组心肌细胞存活率下降(P<0.05),凋亡率升高(P<0.05),LDH漏出率增高(P<0.01),Beclin 1,LC3Ⅱ和P62蛋白水平和LC3阳性细胞率无明显变化。结论 Res对H/R损伤心肌细胞具有保护作用,其机制可能与活化自噬有关。
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