摘要
目的通过细胞和在体研究探讨ABT-737联合吉非替尼对EGFR T790M突变肺腺癌细胞EGFR-TKIs耐药的逆转机制。方法利用MTT和FCM法检测ABT-737联合吉非替尼对RPC-9细胞的增殖和凋亡的影响,以RT-PCR检测细胞内Bim、Bak、Caspase-3 mRNA表达水平。以皮下异位移植法建立EGFR T790M突变肺腺癌裸鼠模型,对各组瘤体组织进行组织病理学检查、基因测序法检测、Real-time PCR和免疫组织化学法分析Bim、Bak、Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平。结果 ABT-737联合吉非替尼对RPC-9细胞有生长抑制作用和凋亡作用,且在ABT-737浓度4μmol/L范围内呈浓度依赖性,最大抑制率为(54.113±2.986)%,最大凋亡率为(55.042±3.151)%,差异均有统计学意义(P<0.05);Bim、Bak及Caspase-3 mRNA表达水平随着ABT-737浓度的升高而增加(P<0.05)。各组瘤体组织病理均为腺癌;ABT-737联合吉非替尼灌胃组裸鼠瘤体体积较其他组小(P<0.05),Bim、Bak、Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平较其他组显著增高(P<0.05)。结论 ABT-737能增强吉非替尼促细胞凋亡作用,使耐药细胞重新发生凋亡。
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单位浙江省人民医院; 杭州市第三人民医院