RhoA基因shRNA表达载体的构建及鉴定

作者：杨开焰; 陈道瑾; 李小荣; 文言广

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2010, (07): 707-708.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.005732

• RhoA
• shRNA
• 结肠癌
• 质粒 RhoA
• shRNA
• colonic cancer
• plasmid

目的:构建针对RhoA基因的shRNA表达载体并进行鉴定。方法:针对人RhoA的mRNA序列,设计并合成编码的shRNA的两条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至pGPU6/GFP/Neo质粒,构建重组体pGPU6/GFP/Neo-RhoA,进行酶切及测序鉴定,然后脂质体转染LoVo细胞。荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达。结果:将合成的DNA序列退火后克隆到载体,酶切及测序证实质粒为所需的序列。结论:成功地构建了针对RhoA基因的shRNA表达载体,为下一步进行RNAi的相关研究奠定了基础。

• 单位
  中南大学湘雅三医院