重组草鱼干扰素IFNγ原核表达及其抗GCRV效果

作者：袁雪梅; 徐铃威; 黄雷; 郝贵杰; 蔺凌云; 潘晓艺; 姚嘉赟; 沈锦玉^*

来源：农业生物技术学报, 2022, 30(07): 1348-1356.

• 草鱼
• 重组干扰素
• 干扰素γ (IFNγ)
• 抗病毒活性
• 草鱼呼肠孤病毒(GCRV)

近年来，由草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)引发的草鱼出血病给该产业造成了严重的损失。为探究重组干扰素对草鱼(Ctenopharyngodon idella)的免疫保护作用及其作用机制，本研究构建草鱼干扰素γ (interferon γ,IFNγ)的原核表达载体PET-30a-rCiIFNγ，并转入大肠杆菌(Escherichia coli)Transetta (DE3)感受态细胞，经IPTG诱导表达及镍柱层析法纯化后获得重组蛋白r CiIFNγ；通过细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)检测rCiIFNγ的体外抗病毒活性；进一步在攻毒实验中评价r CiIFNγ免疫对草鱼体内抗GCRV感染的影响。结果显示，重组草鱼IFNγ融合蛋白(rCiIFNγ)分子量约23 kD，纯化复性后的rCiIFNγ抗病毒效价达2.8×103U/μg;rCiIFNγ不仅能在体外抑制GCRV引起的细胞病变，还可以诱导草鱼肝、脾、肾、肠中IFN、IRFl、IRF7、Mx、PKR和STAT3等干扰素激活基因的表达，并能显著降低GCRV攻毒草鱼的死亡率。上述结果提示重组草鱼IFNγ融合蛋白rCiIFNγ具有明显的体内和体外抗GCRV效果。本研究为草鱼IFNγ在抗病毒方面的应用提供了参考依据。

• 单位
  浙江省淡水水产研究所