Luman-N端融合蛋白单克隆抗体的制备

作者：兰向莉; 李晓; 马延森; 靳亚平

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2013, (02): 1-6.

DOI：10.13207/j.cnki.jnwafu.2013.02.030

• Luman-N端融合蛋白
• 间接ELISA
• 单克隆抗体 Luman-N-term fusion protein
• indirect ELISA
• monoclonal antibody(McAb)

【目的】制备小鼠抗Luman-N端融合蛋白单克隆抗体。【方法】将GST-Luman-N端载体转化大肠杆菌BL21,用IPTG进行诱导表达,并进行SDS-PAGE电泳,用电洗脱的方法纯化融合蛋白;以纯化的融合蛋白为抗原免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,利用间接ELISA方法筛选阳性孔,采用有限稀释法进行亚克隆,筛选具有抗体分泌活性的单克隆细胞株;应用Western Blot、间接ELISA等方法进行克隆株稳定性、抗体特性的鉴定。【结果】获得1株能稳定分泌抗Luman-N端融合蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2C8),其腹水ELISA单抗效价为1∶1×...

• 单位
  西北农林科技大学