摘要
目的:在不同浓度的葡萄糖培养条件下,探讨内皮细胞传代过程中活性氧(ROS)的代谢异常及其对单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法:人脐静脉内皮细胞培养和传代后,选取第2、6代细胞分别在5.5mmol/L或16.5mmol/L葡萄糖培养基中培养,以培养0、12、24、48h为各时间观察点。流式细胞术检测细胞ROS含量,半定量逆转录聚合酶链式反应检测MCP-1的表达。结果:(1)第2代细胞经5.5mmol/L葡萄糖培养,ROS水平相对稳定。经16.5mmol/L葡萄糖培养,ROS则呈时间依赖性增加,培养24h和48h后分别较加入葡萄糖培养前增加56.5%和69.2%。同葡萄糖浓度培养下,各时间点第6代细胞ROS检测值均较第2代细胞有显著意义的增加(均P<0.01)。(2)第2代细胞经5.5mmol/L葡萄糖培养24h后MCP-1 mRNA表达开始上升,可见MCP-1 mRNA表达与时间相关。高葡萄糖培养与低葡萄糖相比,同时间点的MCP-1 mRNA表达均有显著性增强(P<0.01或P<0.05)。同浓度葡萄糖作用下,第6代细胞MCP-1 mRNA表达总体上高于第2代细胞。结论:高浓度葡萄糖培养在进一步提高传代内皮细胞ROS量的同时,促进了MCP-1 mRNA的表达,提示高糖促MCP-1表达作用可能也是通过ROS增加介导的。
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单位华中科技大学同济医学院附属协和医院