植物乳杆菌谷氨酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的表达

作者：田喜梅; 谢琼; 黄仁慧; 陶雪莹; 万翠香; 魏华

来源：南昌大学学报(理科版), 2016, 40(02): 182-187.

DOI：10.13764/j.cnki.ncdl.2016.02.014

• 谷氨酸脱氢酶
• 植物乳杆菌
• 基因表达

构建植物乳杆菌谷氨酸脱氢酶基因原核表达载体,表达并纯化蛋白。本研究以植物乳杆菌ZDY 2013基因组DNA为模板,PCR扩增谷氨酸脱氢酶基因,连接到表达载体pET-32a(+)上,重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达和镍柱亲和层析后获得目的蛋白,活性测定显示该蛋白具有谷氨酸脱氢酶的活性。同时,对表达菌株的酸耐受性测定结果表明,细胞对pH 4.5的酸胁迫耐受性提高1.4倍。实验结果为深入研究植物乳杆菌ZDY 2013谷氨酸脱氢酶保护细胞抵御酸胁迫提供有益的参考。

• 单位
  南昌大学食品科学与技术国家重点实验室; 生命科学学院; 南昌大学