摘要
目的探讨高压氧(HBO)处理对卵巢癌SKOV-3细胞miR-720的表达及其恶性生物学行为的影响。方法卵巢癌SKOV-3细胞按照实验设计分为对照组和HBO组, 对照组SKOV-3细胞常规培养, HBO组SKOV-3细胞常规培养完成后予以0.2 MPa HBO处理。同时将培养好的卵巢癌SKOV-3细胞按照随机数字表法再分为3组, 正常对照(NC)组、HBO组和HBO+miR-720组, 其中HBO组按照HBO条件进行培养, HBO+miR-720组在HBO处理前转染miR-720质粒, HBO组和NC组同时转染NC质粒, 转染24 h后收集细胞进行后续实验。应用qPCR检测SKOV-3细胞miR-720 mRNA表达水平, 应用Western印迹法检测SKOV-3细胞上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白(N-cadherin、E-cadherin、Vimentin)和miR-720蛋白的表达水平, 应用CCK-8法检测SKOV-3细胞增殖能力, 应用克隆形成实验检测SKOV-3细胞克隆形成能力, 应用细胞划痕实验和Transwell实验检测SKOV-3细胞侵袭和迁移能力。结果应用HBO处理后, HBO组卵巢癌SKOV-3细胞的增殖能力、侵袭能力及克隆形成能力明显低于对照组, 划痕宽度比高于对照组(P<0.01);HBO组卵巢癌SKOV-3细胞中miR-720 mRNA和蛋白表达水平均低于对照组(P<0.01)。转染后, HBO+miR-720组SKOV-3细胞中miR-720 mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.05);HBO+miR720组SKOV-3细胞的增殖能力、侵袭能力及克隆形成能力明显高于对照组, 划痕宽度比明显低于对照组(P<0.01);HBO+miR-720组SKOV-3细胞中E-cadherin蛋白表达水平低于HBO组, Vimentin和N-cadherin蛋白表达高于HBO组(P<0.01)。结论 HBO处理能够明显抑制卵巢癌SKOV-3细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成, 其抑制作用与卵巢癌细胞中miR-720表达有关。
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单位临沂市人民医院