摘要
目的 :探讨Numb基因对结肠癌细胞迁移和侵袭的影响及其可能的作用机制。方法:应用蛋白质印迹法检测结肠上皮细胞HCEpi及结肠癌SW480、SW620和HCT-8细胞中Numb蛋白的表达。将含Numb过表达重组载体的慢病毒感染Numb表达水平较低的HCT-8细胞(HCT-8-Numb组),应用蛋白质印迹法检测空白对照组(HCT-8细胞未进行感染)、阴性对照组(HCT-8细胞感染含空载体的慢病毒)和HCT-8-Numb组HCT-8细胞中Numb蛋白的表达水平,并应用蛋白质印迹法、细胞划痕实验和Transwell法检测空白对照组、阴性对照组、HCT-8-Numb组和Ras相关C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)抑制剂NSC23766处理组HCT-8细胞中活化的Rac1蛋白的表达水平以及细胞迁移和侵袭能力。结果:结肠上皮细胞HCEpi中Numb蛋白的表达水平明显高于结肠癌SW480、SW620和HCT-8细胞(P值均<0.05),且HCT-8细胞中Numb蛋白的表达水平最低。HCT-8-Numb组细胞中Numb蛋白的表达水平明显高于空白对照组和阴性对照组(P值均<0.05)。HCT-8-Numb组细胞中活化的Rac1蛋白的表达水平明显低于空白对照组和阴性对照组(P值均<0.05),而与NSC23766处理组细胞中活化的Rac1蛋白的表达水平相比差异无统计学意义(P>0.05)。HCT-8-Numb组细胞的迁移和侵袭能力明显低于空白对照组和阴性对照组(P值均<0.05),而与NSC23766处理组细胞的迁移和侵袭能力相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 :过表达Numb蛋白可抑制结肠癌HCT-8细胞的迁移和侵袭,这一作用可能与抑制Rac1蛋白的活化有关。
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单位上海市嘉定区中心医院; 上海交通大学医学院附属仁济医院