尿酸氧化酶与肌酐水解酶融合基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：程新; 刘芳; 张彦新; 蒋云生

来源：中国现代医学杂志, 2013, 23(13): 11-15.

• 基因克隆
• 基因工程菌
• 尿酸氧化酶
• 肌酐水解酶
• 融合基因 gene cloning
• genetically engineered bacteria
• urate oxidase
• creatinine hydrolase
• fusion gene

目的构建含尿酸氧化酶与肌酐水解酶融合基因的质粒并转化大肠杆菌,使其能同时分泌该两种酶分解尿酸及肌酐。方法根据GenBank数据库已知的尿酸氧化酶基因设计引物,扩增到去掉终止密码子的尿酸氧化酶基因中,并使其连接到质粒pGM36e上构建成pGM36e-U,然后根据已知肌酐水解酶基因设计引物扩增肌酐水解酶基因,把其连接到质粒pGM36e-U中尿酸氧化酶基因后构建成重组质粒pGM36e-U/C,转化大肠杆菌,筛选鉴定重组大肠杆菌,并进行SDS-PAGE分析。将工程菌于特定浓度肌酐和尿酸的培养基中培养24 h,取培养液测定肌酐和尿酸浓度。结果重组质粒得到大小约1.68 kb基因片段。为尿酸氧化酶及肌酐水...

• 单位
  中南大学湘雅二医院; 广西中医学院