A型禽流感病毒不同拷贝数基质蛋白胞外区基因的原核表达及免疫保护力研究

作者：李洪涛; 张新涛; 刘明; 刘春国; 杜金玲; 石薇琳; 孙恩成

来源：中国预防兽医学报, 2010, (10): 795-799.

• A型禽流感病毒
• M2e基因
• 原核表达
• 多克隆抗体
• 免疫保护力 avian influenza A virus
• M2e gene
• prokaryotic expression
• multiclonal antibody
• protective efficacy

为研究含禽流感病毒(AIV)不同拷贝数基质蛋白胞外功能区(M2e)亚单位疫苗在SPF鸡体中的免疫保护效力差异,根据已发表的高致病性AIV M2基因序列设计合成两对引物,利用PCR技术扩增单个M2e基因片段,以此为基础顺次串联得到不同拷贝数的M2e基因片段,并将其克隆到pMAL-C2x载体中,构建不同拷贝数的A型AIV M2e基因的重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定。表达产物经纯化后免疫家兔、SPF鸡,制备抗M2e融合蛋白的多克隆抗体。Western blot和间接免疫荧光试验检测纯化的融合蛋白免疫原性,间接ELISA测定鸡血清抗体水...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 动物科技学院; 农业部; 东北农业大学; 黑龙江八一农垦大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所