本发明公开了一种酶法制备正丁基#β#D#葡萄糖苷的方法。本发明制备了一种β#葡萄糖苷酶催化剂,然后将该催化剂应用于1#烷基#3#甲基咪唑类离子液体微水体系中催化β#D#葡萄糖和正丁醇反应合成正丁基#β#D#葡萄糖苷,产率(以葡萄糖计)达到90~95%。该方法简单、选择性高、产品纯、制备条件温和,从而提供了一种酶催化合成正丁基#β#D#葡萄糖苷的规模化应用方法。