TRBC1和TCR Vβ两种流式细胞仪T细胞克隆性检测方法的对比分析

作者：石韦华; 刘艳荣; 常艳; 袁晓英; 贺玲玲; 郝乐; 殷佳怡; 卢井泉; 王亚哲^*

来源：中国生物工程杂志, 2023, 43(12): 102-110.

DOI：10.13523/j.cb.2310046

• 流式细胞仪
• T细胞
• 克隆性
• TCR Vβ
• TRBC1

目的：分析健康人T细胞各亚群TRBC1和TCR Vβ家族的表达，比较两种流式细胞仪检测T细胞克隆的方法及其判定标准。方法：收集40例健康志愿者外周血，分别对全部CD3+和去除TCR γδ+细胞后的CD3+TCR γδ-T细胞设门，每群T细胞分为CD7+CD5+(T1)、CD7+CD5dim+(T2)、CD7+CD5dim2+(T3)、CD7+CD5-(T4)和CD7-CD5+(T5)5个亚群，分析亚群中CD4、CD8、TCR Vβ家族和TRBC1的表达。结果：39例纳入统计分析，CD3+细胞中，T1、T2、T3、T4和T5的平均比例分别为57.29%、27.74%、5.15%、1.43%和5.99%;T1和T5以CD4+细胞为主，T2、T3和T4以CD8+细胞为主；CD3+中T2、T3和T4亚群中TRBC1+%均明显低于CD3+TCR γδ-T门内相应值(P<0.01)。21例健康人22个亚群中出现TRBC1+%异常(<15%或>85%),主要见于T3和T4亚群；部分亚群可见单个优势Vβ表位，以优势Vβ表位占比≥60%或Vβ总和占比<15%作为判定异常克隆的标准；同时将TRBC1克隆性诊断标准修订为TRBC1+%<12%或>82%后，TRBC1和TCR Vβ两种方法判断克隆性的一致性为96.77%(180/186)。将TCR γδ+细胞影响去除后，分布趋势不变。最终确定的单克隆T细胞发生率为38.46%(15/39),86.67%(13例)克隆性T细胞在淋巴细胞中的比例均低于5%,考虑为生理性克隆性增生；另外2例在淋巴细胞中分别占6.76%和33.24%,可能为意义未明的T细胞克隆(T-cell clones of uncertain signifificance, T-CUS)和T细胞增殖性疾病。结论：健康人利用CD7/CD5分群后在CD5dim+或CD5-亚群内可出现较多的生理性克隆性T细胞，对克隆性T细胞的解释必须与临床密切结合。

• 单位
  北京大学; 北京大学人民医院