益气调髓方通过骨髓间充质干细胞CD56+来源的外泌体调控软骨细胞活性的机制研究

作者：张扬; 缪毛毛; 化昊天; 成锋; 童培建^*

来源：中华骨与关节外科杂志, 2023, 16(01): 45-51.

• 益气调髓方
• +" name="keyword">骨髓间充质干细胞CD56+
• 外泌体
• 软骨细胞

目的：探究益气调髓方(简称“YQTS”)是否通过骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)CD56+来源外泌体调控软骨细胞活性。方法：YQTS给药组和空白给药组大鼠分别灌胃给予YQTS和生理盐水后提取BM-MSCs，流式细胞术、细胞免疫荧光染色分析两组给药后CD56+BM-MSCs的变化；流式细胞术分选CD56+BM-MSCs，并用Transwell小室共培养的方法探究YQTS处理的CD56+BM-MSCs对BM-MSCs软骨分化的影响；提取CD56+BM-MSCs来源的外泌体，考察其对BM-MSCs软骨分化的影响；CCK-8法检测细胞增殖，甲苯胺蓝法检测软骨分化程度，qRT-PCR和western blot检测Ⅱ型胶原和Aggrecan的表达。结果：与空白给药组比较，YQTS给药组BM-MSCs中CD56标记的细胞亚型增加，CD56表达增加(P=0.001);YQTS给药组的CD56+BM-MSCs能有效提高BM-MSCs的成软骨分化能力(P=0.009)。YQTS给药组的软骨细胞增殖率高于空白给药组(P=0.012)，并提高Ⅱ型胶原和Aggrecan的表达。与未加入外泌体的PBS对照组相比，加入YQTS给药组的CD56+BM-MSCs外泌体处理的BM-MSC软骨分化程度更高(P<0.001)，增加Ⅱ型胶原和Aggrecan的表达。结论：YQTS通过CD56+BM-MSCs来源外泌体的细胞间通讯，增加BM-MSCs中CD56+细胞亚型占比，并促进BM-MSCs的软骨分化。

• 单位
  浙江中医药大学; 第一临床医学院; 浙江省中医院