基于转录组学补肾通络丸经MAPK通路保护软骨细胞的作用

作者：路博丞; 周振薇; 张鹏程; 吉海杰; 郑茜^*

来源：山西医科大学学报, 2023, 54(01): 90-95.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2023.01.013

• 补肾通络丸
• 转录组学
• 差异基因
• 细胞增殖
• 软骨细胞
• MAPK通路
• 骨关节炎

目的 探究补肾通络丸(BSTLW)对软骨保护作用的分子机制。方法 从新生C57BL/6J乳鼠肋软骨中获得原代软骨细胞，加入不同浓度(0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2 mg/ml)的BSTLW提取物培养，CCK-8检测细胞活力。将软骨细胞分为BSTLW组和对照组，分别用BSTLW提取物和空白DMEM/F12培养基作用24 h后，提取各组总RNA进行RNA测序和转录组学分析。将差异基因进行GO生物学分子功能富集和KEGG通路富集分析，选择Dusp8、Bdnf、Egf、Fgfr4进行qRT-PCR验证。结果 CCK-8检测结果显示，BSTLW能够提高软骨细胞的增殖活性，浓度为0.8 mg/ml时，促进软骨细胞增殖的能力最强(P<0.01)。RNA-Seq分析结果显示，与对照组比较，BSTLW组软骨细胞中差异基因共709个，其中上调344个，下调365个(P<0.01)。KEGG富集分析显示BSTLW对MAPK通路关键因子的调控丰度最高，整体呈下调趋势(P<0.01)。qRT-PCR验证结果提示BSTLW可以抑制MAPK通路中Dusp8、Bdnf、Fgfr4、Egf关键基因的表达(P<0.01),这与RNA-Seq测序结果一致。结论 补肾通络丸能够对MAPK通路上Bdnf等多基因进行调控发挥软骨保护作用。

• 单位
  山西医科大学; 长春中医药大学附属医院; 山西省中医院; 山西省中医药研究院