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摘要
目的 分析circ＿0008039对乳腺癌细胞自噬、增殖、细胞周期的影响及其机制。方法 选取2018年1月至2019年10月西北妇女儿童医院诊治的30例乳腺癌患者作为研究对象，收集其乳腺癌组织和癌旁组织进行检测。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测乳腺癌组织、癌旁组织中circ＿0008039及微小RNA(miR)-1287-5p表达水平。体外培养健康人乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞系(SKBR3、BT474、MCF-7、BT-20),分别将si-NC、si-circ＿0008039、si-circ＿0008039、anti-miR-NC、si-circ＿0008039与anti-miR-1287-5p转染至BT-20细胞，按照转染方式的不同分为si-NC组、si-circ＿0008039组、si-circ＿0008039+anti-miR-NC组及si-circ＿0008039+anti-miR-1287-5p组。采用qRT-PCR检测各组细胞中circ＿0008039、miR-1287-5p表达水平；采用CCK-8法检测细胞增殖、吸光度(A),采用流式细胞仪检测细胞周期，采用双荧光素酶报告实验检测circ＿0008039与miR-1287-5p的靶向关系，采用Western blotting法检测微管相关蛋白轻链3B(LC3B)、Beclin-1、p21、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白表达水平。结果 乳腺癌组织的circ＿0008039表达水平高于癌旁组织，miR-1287-5p表达水平低于癌旁组织，差异均有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌SKBR3、BT474、MCF-7、BT-20细胞中circ＿0008039的表达水平高于MCF-10A细胞，差异均有统计学意义(P<0.05)。敲低circ＿0008039后，si-circ＿0008039组A、CyclinD1蛋白表达水平低于si-NC组，LC3B、Beclin-1、p21蛋白表达水平高于si-NC组，差异均有统计学意义(P<0.05)。si-circ＿0008039组G0/G1期细胞比值大于si-NC组(P<0.05)。miR-1287-5p组WT-circ＿0008039载体的荧光素酶活性低于miR-NC组(P<0.05)。下调miR-1287-5p表达水平后，si-circ＿0008039+anti-miR-1287-5p组的miR-1287-5p水平、G0/G1期细胞比值、LC3B、Beclin-1、p21蛋白水平低于si-circ＿0008039+anti-miR-NC组，si-circ＿0008039+anti-miR-1287-5p组的A、S期细胞比例、CyclinD1蛋白水平高于si-circ＿0008039+anti-miR-NC组，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 敲低circ＿0008039可通过上调miR-1287-5p诱导乳腺癌细胞周期阻滞，抑制细胞增殖并促进细胞自噬。
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