寻常型银屑病皮损中Notch1表达及对体外培养HaCaT细胞的影响

作者：苏华振; 魏明^*

来源：中国医药生物技术, 2019, 14(05): 412-420.

• 寻常型,银屑病
• 细胞增殖
• 角质形成细胞
• 细胞凋亡
• Notch信号通路

目的研究Notch1在寻常型银屑病皮损中的表达及对体外培养永生化人皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖、凋亡的影响,探究其可能存在的发生机制。方法收集30例寻常型银屑病患者病患处的皮肤组织和30名健康人的皮肤组织,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹技术(Western)测定皮肤组织Notch1、Jagged1 mRNA和蛋白表达量;将HaCaT细胞随机分为激活剂组(2μg/ml Jagged1-Fc融合蛋白)、抑制剂组(20μmol/L DAPT)和空白对照组,体外培养。用细胞计数(CCK-8)法检测HaCaT细胞增殖,用流式细胞术测定人HaCaT细胞的凋亡情况,用Western印迹技术检测HaCaT细胞内凋亡蛋白(Bcl-2、Bax)、involucrin、keratin1蛋白表达。结果寻常型银屑病病人病患处的表皮组织中Jagged1、Notch1m RNA及蛋白表达量均高于健康人皮肤组织(t值分别为4.26、4.78和5.12、4.23,P值均<0.05)。激活剂组、抑制剂组和空白对照组HaCaT细胞增殖抑制率在24、48和72h中差异具有统计学意义(F值分别为123.45、219.67和289.16,P值均<0.05)。激活剂组(5.31%±1.21%)、抑制剂组(26.33%±3.57%)和空白对照组(13.17%±2.18%)HaCaT细胞的凋亡率差异有统计学意义(F=13.96,P <0.05)。激活剂组、抑制剂组与空白对照组HaCaT细胞Bax和Bcl-2蛋白表达分别为(1.28±0.15、0.43±0.08、0.71±0.12)和(0.22±0.08、1.05±0.14、0.53±0.09),差异具有统计学意义(F值分别为9.45和10.23,P值均<0.05)。较空白对照组相比,激活剂组involucrin和keratin1表达的蛋白量明显降低(P值均<0.05);抑制剂组involucrin及keratin1表达的蛋白量明显升高(P值均<0.05)。结论 Notch信号转导通路的激活可能是寻常型银屑病的起病因素之一,而Notch信号转导通路使角质形成细胞增殖加快、使其凋亡和分化受到抑制是其可能存在的作用机制。

• 单位
  郑州大学第五附属医院