实时荧光定量PCR是检测结直肠癌BRAF V600E突变的理想方法

作者：王丛阳; 郭文文; 王家俊; 熊林; 金宁; 王焱^*

来源：临床与实验病理学杂志, 2020, 36(12): 1431-1435.

DOI：10.13315/j.cnki.cjcep.2020.12.010

• 结直肠肿瘤
• 实时荧光定量PCR
• 免疫组织化学
• BRAF V600E

目的应用免疫组化和实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR, qRT-PCR)技术检测结直肠癌中BRAF V600E突变,比较这两种技术在结直肠癌中的应用价值。方法总结113例结直肠癌标本BRAF V600E免疫组化和qRT-PCR的结果,以测序为金标准,评价这两种技术在结直肠癌BRAF V600E突变检测中的应用价值。结果 113例结直肠癌标本中,免疫组化检测阳性19例,阴性82例,不确定诊断12例。其中19例阳性标本经测序确认BRAF V600E突变6例,未突变13例;12例不确定诊断病例经测序确认1例突变,11例未突变。免疫组化阳性检出率为16.81%,阴性检出率为72.57%,不确定诊断例数占检测例数的10.62%。113例结直肠癌标本同时行qRT-PCR检测,结果突变7例,未突变106例,阳性检出率为6.19%,阴性检出率为93.8%,无不确定诊断,与测序结果一致,符合率达100%。以测序为金标准,比较这两种技术在结直肠癌检测BRAF V600E中的应用价值,免疫组化和qRT-PCR技术的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、假阴性率、假阳性率、准确率分别为100%、86.32%、31.58%、100%、0、13.68%、87.13%和100%、100%、100%、100%、0、0、100%。经配对χ2检验这两种检测方法差异有显著性(P<0.000 01)。结论在结直肠癌BRAF V600E检测中,qRT-PCR较免疫组化有更高的准确性。

• 单位
  南京医科大学第二附属医院