三氯化钆抑制Kupffer细胞活化减轻小鼠肝脏部分热缺血再灌注损伤

作者：彭沙沙; 夏丰; 王进; 郭浚^*; 夏国兵; 裴斐; 黄汉飞

来源：中华实验外科杂志, 2019, (10): 1770-1773.

• 三氯化钆
• 肝脏
• 缺血再灌注损伤
• 血红素氧合酶-1

目的 探讨三氯化钆(GdCl3)抑制Kupffer细胞活化减轻小鼠肝脏热缺血再灌注损伤的作用及机制。方法 将48只C57BL/6雄性小鼠随机分为4组,假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IRI组)、三氯化钆组(Gd＋IRI组)、钴原卟啉(CoPP＋IRI)组,每组12只。Sham组与IRI组分别于术前24 h经腹腔注射等体积生理盐水；Gd＋IRI组、CoPP＋IRI组分别于术前24 h经腹腔注射GdCl3(20 mg/kg)、CoPP(5 mg/kg)。除Sham组仅行开关腹手术外,其他组70%肝脏缺血60 min再灌注6 h。比较各组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平。酶联免疫吸附试验检测小鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)活性。肝组织实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、血红素血氧合酶-1(HO-1)及保护性因子IL-10的表达。免疫组织化学法标记肝胆管上皮细胞中凋亡相关基因Fas、FasL的表达。正态分布的两样本均数比较采用独立样本t检验,多组之间比较采用方差分析。结果 IRI组、Gd＋IRI组及CoPP＋IRI组血清ALT分别为(1 236.7±62.4)、(638.9±50.9)、(740.3±53.1) U/L,AST分别为(1 107.8±68.3)、(568.5±42.7)、(679.1±49.9) U/L,Gd＋IRI组及CoPP＋IRI组明显低于IRI组,差异均有统计学意义(t＝6.721、4.732、5.984、2.691,P<0.05)。与IRI组比较,Gd＋IRI组和CoPP＋IRI组的SOD、GSH-Px活性明显提高(t＝7.301、1.937,P<0.05),且MDA含量显著减少(t＝9.519、8.635,P<0.01),Gd＋IRI组及CoPP＋IRI组TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA相对表达明显降低(t＝6.721、2.316,P<0.05),而IL-10、HO-1的mRNA相对表达明显升高,差异有统计学意义(t＝2.973、7.921,P<0.01)。肝血流再灌注6 h后,Gd＋IRI组及CoPP＋IRI组小叶间胆管上皮细胞Fas阳性表达率分别为22.4%、29.7%,低于IRI组(38.9%)差异有统计学意义(χ2＝6.561、2.547,P<0.05)；Gd＋IRI组及CoPP＋IRI组FasL阳性表达率为21.2%、25.1%,明显低于IRI组(36.5%)(χ2＝5.982、3.188,P<0.05)。结论 三氯化钆抑制Kupffer细胞活化,通过抗氧化、抗炎和抗细胞凋亡的作用减轻小鼠HIRI,其机制可能与促进HO-1的表达及下调Fas/FasL的表达有关。

• 单位
  湖北理工学院; 昆明医科大学第一附属医院; 武汉科技大学