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摘要
目的 探讨视网膜微血管周细胞(RMVPCs)来源的外泌体(Exos)通过调控血管内皮细胞的生物学功能进而对糖尿病视网膜血管功能障碍的影响。方法 通过超速离心法提取并鉴定人视网膜微血管周细胞(HRMVPCs)来源的Exos(HRMVPCs-Exos),并对Exos进行PKH67染色后，与人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)孵育进行内吞实验，此后，体外实验分为Control组(5.55 mmol·L-1葡萄糖)、高糖(HG)组(30.00 mmol·L-1葡萄糖)和HG+HRMVPCs-Exos组，各组HUVECs进行相应处理后，应用CCK-8、细胞迁移、流式细胞术以及成管实验等方法检测HUVECs的增殖、迁移以及血管的生成。体内实验分为NC组、链脲佐菌素(STZ)组和STZ+HRMVPCs-Exos组，每组5只健康雄性C57BL/6J小鼠，各组小鼠进行相应处理后，进行眼底照相、OCT、荧光素眼底血管造影(FFA)、视网膜血管密度以及血管渗漏检测。结果 HRMVPCs可分泌Exos,可以进入HUVECs中。与Control组相比，HG组和HG+HRMVPCs-Exos组HUVECs的存活率、迁移率以及血管生成数均显著减少(均为P<0.05);与HG组相比，HG+HRMVPCs-Exos组HUVECs的存活率、迁移率以及血管生成数均显著升高(均为P<0.05)。STZ+HRMVPCs-Exos组小鼠视网膜结构破坏严重，并出现大量渗出物以及荧光素渗漏，而STZ组小鼠视网膜出现少量渗出物和微血管异常，NC组小鼠视网膜无明显病变。与NC组相比，STZ组和STZ+HRMVPCs-Exos组小鼠视网膜血管密度均显著下降(均为P<0.01),血管渗漏面积均显著增加(均为P<0.01)。与STZ组相比，STZ+HRMVPCs-Exos组小鼠视网膜血管密度显著下降(P<0.01),血管渗漏面积显著增加(P<0.01)。结论 HRMVPCs-Exos进入HUVECs中，通过加强HG下HUVECs的生物学功能，最终加重糖尿病小鼠视网膜血管功能障碍。
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