H7亚型禽流感病毒一步法RT-PCR检测方法的建立

作者：包红梅; 王秀荣; 陶启蒙; 蔡东东; 王馥梅; 陈化兰

来源：生物工程学报, 2009, (11): 1658-1663.

DOI：10.13345/j.cjb.2009.11.020

• 禽流感病毒
• 反转录聚合酶链反应
• H7N1
• 亚型鉴别 avian influenza virus
• RT-PCR
• subtype differentiation

通过分析流感数据库45个H7亚型禽流感病毒的HA序列,在保守区内设计并合成引物,建立了一步法RT-PCR检测方法,扩增片段大小为501bp。通过对H7亚型禽流感病毒尿囊液和棉拭子浸出液不同滴度检测,证实病毒尿囊液最低检出量为105.5EID50/mL;阳性棉拭子最低检出量为103EID50/mL。用该方法检测H1～H15亚型禽流感病毒和鸡新城疫病毒等其他14种禽病病原进行检测,仅有H7亚型AIV有特异性目的条带,与其他均无交叉反应。从脏器及咽喉、泄殖腔棉拭子样品的病毒分离和RT-PCR方法比较,表明在10-1的样品浓度下,两者可以达到相同的检出量。表明该一步法RT-PCR方法具有特异性强、敏感...