新型鸭细小病毒SYBR Green I 荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

作者：周洁文; 汤傲星; 戚睿斌; 朱杰; 李传峰; 郭鑫^*; 刘光清^*

来源：中国动物传染病学报, 2020, 28(04): 47-51.

• 新型鸭细小病毒
• SYBR GreenⅠ荧光定量PCR
• 普通PCR

本研究以新型鸭细小病毒VP3基因保守区域克隆至pMD19-T载体上获得的阳性质粒作为标准阳性质粒,建立一种检测新型鸭细小病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。结果显示:在5.17×101～5.17×107拷贝数呈良好的线性关系,相关系数R2为0.999、斜率为3.595,灵敏度可达到5.17拷贝数;该方法用于检测鸭常见传染病呼肠孤(DRV)、禽流感(AIV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鸭病毒性肝炎(DHV)、鸭星状病毒(DAstV)无非特异性扩增,特异性良好;对安徽、山东、江苏等地鸭场采集的疑似病料进行初步检测,发现48份样品中阳性率达70.8%,与普通PCR方法检测结果相比,本研究建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法更灵敏。本研究成功建立了一种检测新型鸭细小病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量方法,为新型鸭细小病毒的监测奠定了坚实基础。

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所; 中国农业大学