农杆菌介导转化玉米自交系B104体系的优化

作者:潘梦影; 王寒; 李亚永; 朱俊杰; 徐秋月; 纪坤; 石慧玥; 张鑫悦; 董永彬*; 李玉玲*
来源:分子植物育种, 2023, 1-11.

摘要

为了提高玉米遗传转化效率,本研究以玉米自交系B104幼胚为受体,β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase, GUS)为报告基因,以GUS瞬时表达率为指标,通过不同温度、不同相对离心力(relative centrifuge force, RCF)、共培养培养基不同MS盐浓度处理玉米幼胚,观察统计GUS基因的瞬时表达效率以及玉米愈伤诱导形成的影响;培养基中不同硝酸银浓度处理玉米幼胚,观察愈伤形成和成苗情况。结果表明:(1)玉米幼胚热激预处理温度为43 ℃时,GUS基因瞬时表达效率最好,且愈伤组织形成率为100%。(2)10 000 RCF处理玉米幼胚,对盾片区GUS瞬时表达率和愈伤组织诱导形成率具有作用,能有效提高玉米幼胚的遗传转化效率。(3)共培养培养基50% MS盐浓度更有利于愈伤组织的形成,同时GUS瞬时表达情况较好。(4)激素6-BAP浓度对玉米愈伤组织发育和再生有明显的促进作用。(5)硝酸银对玉米幼胚愈伤的形成有明显的抑制作用,但对再生成苗有显著的促进作用。本研究为进一步优化玉米自交系的遗传转化效率提供了科学依据。