基于HIF-1α/ERK通路探讨异丙酚对缺氧大鼠海马神经元线粒体损伤的影响

作者：妙永惠; 阎文军

来源：中国现代医学杂志, 2023, 33(01): 38-44.

• 缺氧
• 异丙酚
• 海马神经元
• 线粒体损伤
• 缺氧诱导因子-1α
• 细胞外调节激酶

目的 观察异丙酚通过缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/细胞外调节激酶(ERK)通路对缺氧大鼠海马神经元线粒体损伤的影响。方法 新生SD大鼠离体培养原代海马神经元细胞，随机分为6组。对照组(高糖DMEM培养液)、缺氧组(低糖DMEM培养液)、LP组(3 mg/L异丙酚的低糖DMEM培养液)、MP组(6 mg/L异丙酚的低糖DMEM培养液)、HP组(12 mg/L异丙酚的低糖DMEM培养液)及U0126组(终浓度12 mg/L异丙酚+50μmol/L U0126的低糖DMEM培养液)。缺氧组、LP组、MP组、HP组及U0126组于缺氧条件培养24 h；对照组于有氧条件培养24 h。透射电镜观察各组海马神经元细胞形态；MTT法检测细胞存活率；激光共聚焦显微镜检测Ca2+、活性氧(ROS)的荧光强度；酶联免疫吸附试验检测细胞钙调神经磷酸酶(GaN)活性；Western blotting检测HIF-1α、ERK1/2、p-ERK1/2、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达。结果 缺氧组线粒体损伤严重，LP、MP和HP组线粒体损伤均有所减轻，HP组减轻最为明显，U0126组线粒体损伤较HP组严重。与缺氧组海马神经元细胞存活率(42.30±3.64)%比较，MP组(59.54±5.19)%、HP组(70.81±6.47)%及U0126组(53.08±5.61)%均升高，且HP组高于MP组和U0126组(P<0.05)。与缺氧组Ca2+、ROS荧光强度[(0.107±0.004)、(0.087±0.003)]比较，LP组ROS荧光强度(0.078±0.003)及MP组、HP组及U0126组Ca2+荧光强度[(0.085±0.003)、(0.067±0.002)、(0.090±0.003)]、ROS荧光强度[(0.060±0.002)、(0.051±0.005)、(0.076±0.003)]均降低(P<0.05),HP组低于MP组和U0126组(P<0.05)。与缺氧组GaN活性(0.61±0.05)u/mg比较，MP组、HP组及U0126组[(0.50±0.05)u/mg、(0.37±0.04)u/mg、(0.54±0.04)u/mg]降低，且HP组低于MP组和U0126组(P<0.05)。与缺氧组比较，LP组、MP组、HP组及U0126组HIF-1α、p-ERK1/2蛋白相对表达量升高，且HP组高于LP组、MP组和U0126组(P<0.05)；与缺氧组比较，LP组、MP组、HP组及U0126组Caspase-3蛋白相对表达量降低，且HP组低于LP组、MP组和U0126组(P<0.05)。结论 异丙酚可减轻缺氧大鼠海马神经元线粒体损伤，其调控机制可能与HIF-1α/ERK通路有关。

• 单位
  临夏州人民医院; 甘肃省人民医院