摘要

为了确定H5N8亚型禽流感病毒新的抗原表位,本研究将原核表达的H5N8亚型禽流感QH448毒株HA1蛋白为免疫原免疫小鼠,通过筛选获得5株抗QH448(H5N8)HA1蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株。经鉴定,1H12B9、8A9D10和9H10F5的重链为IgG1亚型,2A9D11和7E9G6的重链为IgG2b亚型,而轻链均为κ链。5株单克隆抗体均能特异性识别H5亚型禽流感病毒HA蛋白。通过截短表达的策略确定,1H12B9和7E9G6的识别表位为330ATGLRNSPLREKRRKR345,2A9D11、8A12D10和9H10F5的识别表位分别为310IHPLTIGECPKYVKSN325、271KIVKKGDSTIMKSEV285和121LSRINHFEKILIIPKS136。同源性比较结果显示,筛选出的4个抗原表位在H5-HA蛋白序列中均高度保守。综上所述,本研究获得了5株抗H5-HA蛋白不同抗原表位的特异性单克隆抗体细胞株,为H5N8亚型AIV的诊断提供了新的靶标抗体。

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