加热对大鼠表皮干细胞HSP70表达及细胞增殖的影响

作者：王强; 邓先见; 徐苗苗; 程勇

来源：湘南学院学报(医学版), 2014, 16(02): 5-10.

• 表皮干细胞
• HSP70
• 热损伤

目的分离、培养并鉴定SD大鼠表皮干细胞;观察不同温度加热对表皮干细胞热耐受预测因子HSP70表达和细胞增殖的影响。方法体外分离培养大鼠表皮干细胞,用倒置显微镜观察其形态,以角质形成细胞作为对照;采用细胞免疫荧光技术对β1-整合素、干性标志物K19、α6及分化标志物K10进行鉴定;实验对37、41、43、45、47、49℃热处理的表皮干细胞采用MTT法测定细胞吸光度值,计算细胞存活率;Western blot法测定HSP70表达的变化。结果分离的细胞体积小,核质比大,集落生长,呈典型的铺路石样结构;实验组细胞干性标志物K19、β1-整合素及α6呈阳性表达,分化标志物K10表达阴性;随着温度升高,细胞HSP70表达增加,于47℃时表达量达到峰值,同时细胞随温度升高存活率逐渐降低,于45℃49℃时降低幅度下降成一水平趋势。结论成功建立了SD大鼠表皮干细胞分离、培养方法,升高温度可抑制表皮干细胞增殖能力,细胞存活率下降,提示HSP70表达增加对表皮干细胞热损伤可能具有保护作用。

• 单位
  创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室; 第三军医大学; 南华大学