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摘要
目的 检测miR-196和CDK6在骨肉瘤组织中的表达情况，通过构建过表达和低表达miR-196的转染载体检测miR-196对CDK6表达的调控以及对骨肉瘤细胞增殖的影响。方法 通过生物信息学检测miR-196在骨肉瘤中的差异性表达，使用miRDB数据库寻找可能靶向CDK6的候选miRNA,采用RT-qPCR和Western blotting检测miR-196和CDK6表达之间的调控关系，MTT实验测定转染miR-196 mimic和miR-196 inhibitor的骨肉瘤细胞增殖活性，双荧光素酶报告实验检测miR-196在骨肉瘤细胞中对CDK6的调控作用。结果 骨肉瘤组织中miR-196表达下调1.773 993倍。构建过表达miR-196载体发现骨肉瘤细胞中CDK6的表达显著下调(P<0.05)。与此同时，miR-196的过表达能够使骨肉瘤细胞的增殖活性显著降低。结论 miR-196能够通过下调CDK6的表达来抑制骨肉瘤细胞的增殖。
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单位中国医科大学附属盛京医院
