建立ARMS- LNA- qPCR方法检测肺癌组织中EGFR- T790M突变率

作者：朱玲; 王志远; 赵跃峰; 梁国威^*

来源：标记免疫分析与临床, 2020, 27(05): 874-878.

DOI：10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2020.05.033

• 荧光定量PCR
• 肺癌
• 表皮生长因子受体
• T790M

目的建立一种新的实时荧光定量PCR方法检测肺癌组织中表皮生长因子受体(EGFR)基因T790M突变。方法采用等位基因扩增阻滞原理(ARMS)引物结合锁核酸(LNA)探针作为野生等位基因抑制子,建立实时荧光定量PCR的T790M突变检测方法(ARMS-LNA-qPCR),通过T790M突变率标准品的荧光定量PCR标准曲线定量检测样本的T790M突变率。收集我院疑似肺癌患者手术的冰冻组织标本51例,每例组织标本分为3份,分别提取DNA进行检测。根据术后病理结果,其中13例非肺癌患者用于所建方法检测下限评价,38例非小细胞肺癌进行T790M突变率检测。结果ARMS-LNA-qPCR方法定量检测T790M突变率的下限为0.04%。用所建方法检测38例NSCLC组织标本中,37例为T790M突变阴性,1例(2.6%)T790M突变阳性(其突变率分别为35.245%,46.303%和28.276%)。结论所建ARMS-LNA-qPCR方法具有检测灵敏度高,临床常规普及应用等特点,可广泛应用于临床。

• 单位
  北京大学; 航天中心医院