科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 探讨RICTOR对食管鳞状细胞癌细胞增殖能力的影响，分析RICTOR在食管鳞状细胞癌中的生物学功能。方法 使用cBioPortal数据库分析RICTOR表达及对肿瘤患者预后的影响。采用siRNA干扰技术分别构建食管鳞状细胞癌细胞KYSE30和KYSE150的siRNA-NC、siRNA1-RICTOR和siRNA2-RICTOR细胞，使用细胞计数试剂盒8（CCK8）和克隆形成实验检测各组细胞增殖和克隆形成能力的差异。慢病毒转染法构建KYSE30稳定敲降RICTOR的shRNA-RICTOR及shRNA-NC细胞，通过裸鼠皮下成瘤实验检测RICTOR敲降后对荷瘤小鼠移植瘤生长的影响。蛋白质印迹法检测RICTOR下游靶蛋白的表达水平，并通过体外实验初步探究RICTOR抑制剂JR-AB2-011对食管鳞状细胞癌细胞增殖的影响。结果 数据库分析结果显示，RICTOR高表达与肿瘤患者预后差相关（P=0.013）。CCK8检测结果显示，敲降RICTOR基因后第96 h,在KYSE30细胞系中，与siRNA-NC（1.46±0.02）相比，siRNA1-RICTOR（0.85±0.03）和siRNA2-RICTOR（0.70±0.03）细胞增殖能力降低，t值分别为33.51和47.13,均P3,t=2.62,P=0.031。蛋白质印迹法检测结果显示，RICTOR参与调控AKT信号通路，敲降RICTOR的食管鳞状细胞癌细胞AKT Ser473位点磷酸化水平显著下调。此外，体外实验表明，RICTOR的抑制剂JR-AB2-011在0.25μmol/L浓度下培养KYSE30和KYSE150细胞72 h抑制细胞增殖，差异均有统计学意义，t值分别为39.64和28.22,均P<0.001。结论 RICTOR可能是通过调控AKT信号通路影响食管鳞状细胞癌细胞增殖和克隆形成能力，抑制RICTOR信号通路具有潜在的抗肿瘤临床价值。
- 单位
