清胰片中抑制NF-κB激活的有效化学成分筛选

作者：李宏宇; 夏亚飞; 阎姝^*

来源：广东化工, 2022, 49(10): 56-81.

• 清胰片
• NF-κB
• 双荧光素酶报告基因
• UPLC-Q-TOF
• 化学成分

目的：筛选清胰片中抑制NF-κB激活的有效化学成分。方法：利用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇对清胰片进行分级萃取，制备各有机相和水相的提取物，将NF-κB报告基因质粒导入HEK293T细胞，再用TNF-α刺激293T细胞来构建体外细胞模型，地塞米松为阳性药，实验分为空白组、模型组、阳性药物组、各有机相提取物组和水相提取物组，利用双荧光报告基因系统筛选出明显抑制NF-κB激活的有效化学成分，通过UPLC-Q-TOF的方法对其进行组分分离，同时收集谱图中各个保留时间段的UPLC馏分，通过双荧光报告基因系统筛选出明显抑制NF-κB激活的馏分组，结合质谱信息和相关文献分析有效馏分组对应保留时间段所含有的主要化合物，最后通过双荧光报告基因系统验证各化学成分抑制NF-κB激活的能力。结果：与空白组相比，模型组能显著激活NF-κB的表达(p<0.001)；与模型组相比，阳性药物、水提物和醇提物组均能显著抑制NF-κB的激活(p<0.001)，而且有一定的剂量依赖性。根据有效馏分对应保留时间段的质谱信息找出十种有效化学成分。结论：从清胰片中分离筛选出七种能显著抑制NF-κB激活的有效化学成分，分别为芍药内酯苷、黄芩苷、大黄素、没食子酸、大黄酸、胡黄连苷II、汉黄芩苷。

• 单位
  天津医科大学; 天津市南开医院