LC-MS/MS法测定环鸟苷酸-腺苷酸的方法学建立及其应用

作者：冯燕; 陈振花; 朱华结^*; 董芳霆; 吴胜明^*

来源：国际药学研究杂志, 2020, 47(11): 1010-1014.

DOI：10.13220/j.cnki.jipr.2020.11.019

• 2’,3’-环鸟苷酸腺苷酸
• 环鸟苷酸-腺苷酸合酶
• 液质联用

目的建立LC-MS/MS方法检测环鸟苷酸-腺苷酸(cGAMP)含量。方法选用程序梯度法,色谱柱为PC HILLIC色谱柱(2.0 mm×150.0 mm,5μm),流动相A为10 mmol/L甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸),流动相B为0.1%甲酸乙腈溶液,流速为0.4 ml/min,柱温为30℃,进样量为10μl。质谱优化条件:多反应监测(mμltiple reaction monitoring,MRM)模式,cGAMP[M+H]+为675.22,锥孔电压56 V,碰撞能量为20 eV。结果 cGAMP在1～1000 ng/ml浓度范围内线性关系良好(n=9,r2=0.9999);方法定量限为1 ng/ml,批间/批内精密度均<20%,批间准确度为83%～96%,批内准确度87%～95%;方法提取回收率为80%～90%,基质效应<10%。结论该检测方法简单、快速、灵敏、准确,适用于细胞或体外cGAS酶合成cGAMP定量分析。

• 单位
  河北大学