结核分枝杆菌免疫优势抗原ESAT-6真核表达载体的构建及蛋白表达的鉴定

作者：龙洋; 鲍朗; 吴悦涵; 赵明才; 曾献武; 张会东; 朱庆平

来源：中国呼吸与危重监护杂志, 2004, (03): 57-60.

• 结核分枝杆菌
• 早期分泌性抗原靶
• 真核表达质粒
• 表达蛋白 Mycobacterium tuberculosis
• Early secreted antigenic target
• Eukaryotic expression vector
• Expression protein

目的　克隆并表达结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶ESAT 6的编码基因 ,为研究其免疫功能奠定基础。方法　以结核分枝杆菌H37Rv株基因组为模板 ,用PCR对ESAT 6基因进行扩增 ,扩增产物克隆到真核表达载体pcDNA3 1/Zeo( )中。对重组表达载体pcDNA ESAT 6进行酶切、PCR及测序鉴定。经鉴定无误的重组质粒用DEAE 葡聚糖法转染COS 7细胞 4 8h后 ,用Trizol法提取转染细胞总RNA进行RT PCR鉴定。结果　重组质粒pcDNA ESAT 6构建成功 ,并能在COS 7细胞中有效表达。结论　结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶ESAT 6真核重组表达质粒pcDNA E...

• 单位
  四川大学; 华西医学中心