绵羊磷脂酶C-γ1对绵羊卵母细胞体外成熟的影响

作者：刘欣杰; 吴晓雪; 刘素平; 袁利明; 陈宁; 赛务加甫^*

来源：畜牧兽医学报, 2022, 53(10): 3459-3469.

• PLC-γ1
• 绵羊卵母细胞
• U73122
• m-3M3FBS

卵母细胞成熟率可作为衡量体外培养卵母细胞质量和发育能力的指标。本研究旨在探讨PLC-γ1是否参与了绵羊卵母细胞的体外成熟及其影响。将绵羊卵母细胞在含有不同浓度的U73122(PLC抑制剂))及m-3M3FBS(PLC激活剂)的成熟培养液中进行培养，每个浓度150个细胞，重复试验3次，统计细胞成熟率、卵裂率及桑葚胚率以供筛选出PLC-γ1的最佳抑制及促进浓度。qPCR检测0.5μmol·L-1 U73122及0.5μmol·L-1 m-3M3FBS处理后48 h的卵母细胞中PLC-γ1、BAK、BAX、CASP3、CASP8、P53、BCL6基因mRNA水平表达情况，Western blot检测0.5μmol·L-1 U73122及0.5μmol·L-1 m-3M3FBS处理后48 h的卵母细胞中PLC-γ1、BAK、BAX、CASP3、CASP8、P53、BCL6蛋白的表达情况。每个浓度150个细胞，重复试验3次。在绵羊卵母细胞中，0.5μmol·L-1 U73122是促进成熟的最佳浓度，0.5μmol·L-1 m-3M3FBS是抑制成熟的最佳浓度。0.5μmol·L-1 U73122处理组卵裂率和囊胚率均显著低于对照组。0.5μmol·L-1 m-3M3FBS处理组卵裂率和囊胚率均显著高于对照组。通过qPCR检测结果显示，与对照组相比，U73122组中BAK、BAX、CASP3、CASP8、P53基因mRNA表达量显著上升，PLC-γ1、BCL6基因mRNA表达量显著下降；m-3M3FBS组则与之相反。Western blot结果显示，与对照组相比，U73122组中BAK、BAX、CASP8蛋白表达量显著增多，PLC-γ1、BCL6蛋白表达量显著减少，P53和CASP3蛋白表达量无明显变化。m-3M3FBS组中PLC-γ1、BCL6蛋白表达量显著增多，BAX、CASP3、P53蛋白表达量显著减少，BAK、CASP8蛋白表达量无明显变化。综上所述，本研究表明PLC-γ1在绵羊卵母细胞的体外成熟培养中发挥重要作用，其可调节卵母细胞的成熟以及早期胚胎的发育能力。

• 单位
  动物科技学院; 石河子大学