B族链球菌基质辅助激光解析电离飞行时间质谱蛋白指纹特征肽峰验证研究

作者：陈光炼; 刘海英; 高坎坎; 关小珊; 钟华敏; 邓秋连; 谌亚星; 梁文怡; 蒋莹; 谢永强; 黄莲芬^*

来源：中华实验和临床感染病杂志(电子版), 2021, 15(03): 209-215.

• B族链球菌
• 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱
• 肽峰
• D-试验

目的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析验证既往发现的B族链球菌(GBS)序列分型(ST)、血清型蛋白指纹特征肽峰及D试验阳性相关肽峰,为临床GBS快速分型和有效诊疗提供依据。方法选取2015年1月至2017年12月全国多中心新生儿侵袭感染分离的237株GBS,均已知血清分型及多序列分型(MLST),运用Bruker微生物质谱仪采集菌体蛋白的肽指纹图谱,纸片扩散法分析菌株对红霉素和克林霉素耐药表型及红霉素诱导克林霉素的耐药发生率,用FlexAnalysis 3.0软件分析和验证特征肽峰。结果分子分型相关特征肽峰分析示,237株GBS均未见m/z 7 625肽峰,但48.3%ST17型菌株中(41/85)有m/z 7 620肽峰;所有ST1型菌株(2/2)均检出m/z 6 250肽峰且无m/z 6 888肽峰,即肽峰对(m/z 6 250+/6 888-),该峰对亦见于所有ST10菌株(31株)及ST2(2株)、ST4(1株)、ST156(1株)和ST579(1株)菌株。血清分型相关特征肽峰示,m/z 6 891在血清Ⅲ型(96.4%、133/138)和Ⅰb型(81.2%、56/69)常见,但在Ⅰa(90.5%、19/21)和Ⅴ型(87.5%、7/8)亦常见,故m/z 6 891肽峰无血清型特异性;m/z 7 620处小肽峰可见于29.7%Ⅲ型菌株(41/138),且均为ST17型,于其他血清型中偶见,包括Ⅴ型(12.5%、1/8)、Ⅰa型(9.5%、2/21)和Ⅰb(2.9%、2/69)。m/z 7620肽峰对Ⅲ/ST17型GBS判断的灵敏度和特异性分别可达48.2%和93.1%。D-试验阳性耐药相关特征峰,红霉素为中介或耐药,克林霉素敏感的菌株占33.76%(80/237),其中D-试验阳性占77.5%(62/80)。主要克隆亚型D试验阳性率从高到低依次为ST10/Ⅰb(100%、9/9)和ST12/Ⅰb或ST12/Ⅲ(100%、13/13)、ST17/Ⅲ(90%、27/30)、ST19/Ⅲ(40%、4/10)、ST23/Ⅰa(16.67%、1/6),ST10、ST12和ST17亚型D试验阳性率高达94.23%(49/52)。结论肽峰对(m/z 6 250+/6 888-)为ST1、ST10及少许罕见ST型GBS菌共有特征峰,m/z 6 891为不同血清型共有肽峰,而非Ⅲ/Ⅰb特异;m/z 7 620则为Ⅲ/ST17型菌特征肽峰,提示其可用于高毒力GBS的快速鉴定;100%ST10、ST12和90%ST17 D-试验阳性,其ST型特征肽峰可用于预测GBS D实验阳性。

• 单位
  广州医科大学; 广州市妇女儿童医疗中心