摘要
目的:探讨微小RNA(miR)-1275对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖凋亡的影响及其机制。方法:采用实时荧光定量PCR(q PCR)检测人正常软骨细胞和OA软骨细胞中miR-1275的表达情况。将体外培养的OA软骨细胞分为模拟物对照组、模拟物组、抑制剂对照组和抑制剂组,将miR-1275模拟物、miR-1275抑制剂及其阴性对照转染至OA软骨细胞,采用qPCR检测miR-1275的表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测沉默信息调节因子2(SIRT2)、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白的表达,生物信息学软件预测、双荧光素酶报告基因实验检验miR-1275和SIRT2的靶向关系。结果:与人正常软骨细胞比较,人OA软骨细胞中miR-1275表达水平明显升高(P<0.05)。与模拟物对照组比较,模拟物组细胞中miR-1275表达水平和细胞凋亡率、Bax、CleavedCaspase-3蛋白水平明显升高,细胞增殖活力与SIRT2蛋白水平明显降低(P<0.05);而抑制剂组细胞中miR-1275表达水平和细胞凋亡率、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白水平明显低于抑制剂对照组,细胞增殖活力与中SIRT2蛋白水平明显高于抑制剂对照组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示SIRT2是miR-1275的靶基因。结论:miR-1275在人OA软骨细胞中高表达,并发挥着抑制软骨细胞增殖和促进细胞凋亡的作用,其作用机制可能与靶向调控SIRT2表达有关。
-
单位秦皇岛市中医医院