人肝细胞生长因子mRNA实时荧光PCR定量标准的构建

作者：岑东; 吕建新; 裴仁治; 刘东海; 张顺; 陆永绥

来源：温州医学院学报, 2004, (3): 163-166.

DOI：10.3969/j.issn.1000-2138.2004.03.002

• 肝细胞生长因子
• mRNA
• PCR
• 参考标准

目的:构建实时荧光定量PCR(FQ-PCR)标准以定量检测人肝细胞生长因子mRNA的表达.方法:采用RT-PCR法利用肝组织提取的总RNA制备肝细胞生长因子cDNA目的片段.与pGEM-TEasy Vector连接成重组质粒并转化E.coli DH5α.联合用直接PCR、α互补和氨苄青霉素筛选法、EcoRI限制性酶切和序列分析法鉴定其特异性.测定纯化的重组质粒A260,确定浓度并以此制备

• 单位
  公共卫生学院; 温州医学院