犀角地黄汤合银翘散干预流行性感冒病毒感染的巨噬细胞炎症机制的网络药理学预测及实验验证

作者：邓迪; 马璐瑶; 刘天怡; 周娜; 刘梦华; 杨明锐; 邱宗林; 郝钰^*

来源：北京中医药大学学报, 2023, 46(01): 57-64.

• 犀角地黄汤合银翘散
• 流行性感冒病毒
• 网络药理学
• 巨噬细胞
• Toll样受体4/核转录因子-κB通路

目的 探究犀角地黄汤合银翘散(XDY)干预流行性感冒病毒(简称“流感病毒”)感染的巨噬细胞炎症的分子机制。方法 通过GEO数据库公开发表的基因芯片筛选流感病毒PR8感染人巨噬细胞的相关基因；将XDY的活性成分与流感病毒PR8感染人巨噬细胞的相关差异基因的交集输入STRING数据库，获得靶点蛋白相互作用关系，根据蛋白相互作用密切度得到核心靶点，使用Cytoscape3.7.2软件可视化蛋白-蛋白互作网络，对该网络进行拓扑学分析；使用Metascape数据库对靶点分别进行通路富集分析。将巨噬细胞J774A.1分为正常组(正常培养)、模型组(流感病毒PR8感染)、犀角地黄汤合银翘散组(流感病毒PR8感染+XDY 162.5 mg/L),干预24 h。实时荧光PCR检测细胞中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关分子6(TRAF6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)mRNA水平；免疫荧光检测核转录因子-κB(NF-κB)核转位情况；酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中TNF-α和IL-6水平。结果 XDY与流感病毒PR8感染人巨噬细胞的差异基因取交集后得到104个共同靶点，通路富集分析结果显示，XDY治疗流感涉及TLR4/NF-κB通路；实时荧光PCR检测结果显示，与模型组比较，犀角地黄汤合银翘散组巨噬细胞的TLR4、MyD88、TRAF6、TNF-α和IL-6 mRNA表达水平降低(P<0.01)。免疫荧光显示，与模型组相比，犀角地黄汤合银翘散组巨噬细胞胞内NF-κB与细胞核共定位现象减少，核质比降低(P<0.01)。ELISA检测结果显示，与模型组比较，犀角地黄汤合银翘散组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平均降低(P<0.01)。结论 犀角地黄汤合银翘散可通过调节TLR4/NF-κB通路减轻流感病毒感染巨噬细胞的炎症反应。

• 单位
  北京中医药大学; 生命科学学院