牛病毒性腹泻病毒Erns蛋白激活NLRP3炎症小体诱发细胞焦亡的研究

作者：李园; 韩言言; 钟林翰; 宋京格; 周佳莹; 王美; 徐义刚^*

来源：微生物学报, 2023, 1-11.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20230196

• 牛病毒性腹泻病毒
• Erns蛋白
• NLRP3炎症体
• 细胞焦亡

【目的】牛病毒性腹泻病毒（BVDV）是引起牛病毒性腹泻-黏膜病的关键病毒。BVDV的结构蛋白Erns可在病毒感染的初期削弱宿主的免疫防御，引发牛群炎症反应。核苷酸寡聚化结构域样受体（NOD）热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）炎症小体是NOD样受体(NLRs)家族重要成员，调控炎症性疾病的发生发展，同时激活的NLRP3炎症小体能够引起宿主细胞焦亡，进而诱发级联放大的炎症反应。但BVDV Erns蛋白在BVDV感染诱发炎症反应的分子机制尚不清楚。【方法】为进一步探索Erns蛋白对BVDV感染激活NLRP3炎症小体诱发细胞焦亡的影响，构建了BVDV Erns蛋白的真核表达质粒pCMV-HA-Erns，过表达BVDV Erns蛋白，检测BVDV感染细胞中NLRP3炎症小体组分（半胱氨酸蛋白酶（Caspase-1）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和NLRP3）、IL-1β的mRNA转录水平和蛋白表达水平，以及细胞死亡调节蛋白（GSDMD）的基因表达和蛋白剪切情况，并通过扫描电镜观察BT细胞膜成孔及BT细胞内容物释放情况，以分析Erns蛋白诱导BT细胞产生细胞焦亡。【结果】Erns蛋白能够显著引起NLRP3炎症小体活化进而激活Caspase-1，活化的Caspase-1一方面切割GSDMD，形成有活性的GSDMD-N端并在BT细胞膜形成孔洞，释放内容物，诱导BT细胞发生细胞焦亡，另一方面活化的Caspase-1切割pro-IL-1β，形成有活性的IL-1β，并释放到BT细胞外，引起BT细胞上清中IL-1β水平上升。【结论】系统解析了BVDV Erns蛋白激活NLRP3炎症小体介导细胞焦亡的产生，对疫苗及治疗药物的研制具有重要指导意义。

• 单位
  动物科技学院; 浙江农林大学