AJUBA通过磷酸果糖激酶PFKM影响糖酵解调控结直肠癌细胞生长

作者：陈皓南; 阿不都沙拉木·亚力昆; 王宁; 管冰杰; 朱仔燕; 危姗姗; 张米粒; 刘友东; 李继坤^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(12).

• AJUBA
• 结直肠癌
• 细胞增殖
• 糖酵解
• 磷酸果糖激酶

目的探讨AJUBA对结直肠癌(CRC)细胞的生长代谢功能影响以及引起改变的原因。方法通过使用免疫组织化学技术, 比较CRC组织和癌旁组织的AJUBA表达量。随后, 使用短发卡RNA(short hairpin RNA, shRNA)在人CRC细胞系SW480中敲低AJUBA, 并将其分成sh-AJUBA组和sh-NC组(阴性对照组)。使用EdU和细胞计数试剂盒(CCK-8)法, 观察敲低AJUBA对肿瘤细胞增殖影响, Seahorse检测其糖酵解水平。通过对RNA测序数据分析, 选择糖酵解关键基因磷酸果糖激酶(PFKM), 将其过表达后检测增殖能力和糖酵解能力的变化。分别采用t检验和方差分析比较两组或多组间差异。结果 CRC癌组织中, AJUBA表达显著升高(60.180±5.046比9.720±2.002, t=15.160, P<0.01)。与sh-NC比较, AJUBA敲低后(0.310±0.212比1.000±0.121, t=9.746, P<0.01), 细胞增殖能力出现明显抑制(9.040±1.351比58.470±3.940, t=20.560, P<0.01), 糖酵解能力也显著下调(43.770±2.740比100.300±2.555, t=26.120, P<0.01)。在回补PFKM催化后产物丙酮酸后, 细胞增殖能力有所恢复。将PFKM过表达后, sh-AJUBA组的增殖能力和糖酵解能力都明显上升(0.90±0.02比0.40±0.02、0.42±0.02比0.18±0.02, t=36.12、15.35, P<0.01;178.30±4.80比146.00±3.30、159.80±10.52比57.15±1.77, t=11.08、19.24, P<0.01、0.001)。结论 AJUBA在CRC癌组织中高表达, 并通过调控PFKM的表达影响糖酵解而改变细胞增殖能力。

• 单位
  嘉兴学院; 南京医科大学; 上海交通大学