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摘要
目的:观察苗医弩药针疗法对膝骨性关节炎(KOA)模型家兔膝关节滑膜组织瞬时感受器电位香草酸受体(TRPV)通道的影响,探讨苗医弩药针疗法治疗KOA的作用机制。方法:从34只新西兰雄性家兔中随机选取6只作为正常组,其余家兔采用右膝关节腔注射木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸混合液的方法建立KOA模型,将造模成功的24只家兔随机分为模型组、弩药针组、皮肤针组和涂抹组,各6只。弩药针组家兔采用苗医弩药针疗法于右膝关节面(以血海、梁丘、阳陵泉、阴陵泉为4点的长方形内)上呈"米"字型滚刺;皮肤针组采用皮肤滚针于右膝关节面进行滚刺;涂抹组以弩药液涂抹右膝关节面。隔日1次,每周3次,连续干预4周。于实验第1、21、28、35、42、49天检测家兔机械刺激的缩足阈值(von Frey阈值)。干预结束后,HE染色法观察家兔右膝关节软骨组织形态学改变;ELISA法检测家兔右膝关节液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;Western blot法和real-time PCR检测家兔右膝关节滑膜组织中TRPV1、TRPV4蛋白和mRNA的相对表达量。结果:与正常组比较,模型组家兔实验第49天von Frey阈值显著降低(P<0.01);右膝关节软骨表面完整性严重破坏,结构层次紊乱,软骨细胞成簇,潮线扭曲,基质染色消失;右膝关节液中IL-1β、TNF-α含量显著升高(P<0.01);右膝关节滑膜组织中TRPV1、TRPV4蛋白和mRNA相对表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,弩药针组、皮肤针组和涂抹组家兔实验第49天von Frey阈值显著升高(P<0.01);右膝关节软骨形态较完整,结构层次较清晰,细胞排列有序,基质染色较均匀;右膝关节液中IL-1β、TNF-α含量显著降低(P<0.01,P<0.05);右膝关节滑膜组织中TRPV1、TRPV4蛋白和mRNA的相对表达水平均显著降低(P<0.01)。与皮肤针组和涂抹组比较,弩药针组家兔实验第49天von Frey阈值显著升高(P<0.01);右膝关节软骨表面平整,结构层次清晰;右膝关节液中IL-1β、TNF-α含量降低(P<0.05);右膝关节滑膜组织中TRPV1、TRPV4蛋白相对表达量降低(P<0.01,P<0.05);与涂抹组比较,弩药针组家兔右膝关节滑膜组织TRPV1 mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)。结论:苗医弩药针疗法可能通过抑制膝关节液中IL-1β、TNF-α的表达,下调膝关节滑膜组织中TRPV1、TRPV4表达,发挥治疗KOA作用。
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