摘要
为了提高咸鸭蛋清的综合利用,制备咸鸭蛋清抗氧化肽。该研究以脱盐咸鸭蛋清粉为原料,以自由基清除能力为指标,筛选出最适蛋白酶并确定水解条件。再通过超滤联用中压柱层析技术依次对水解粗肽进行分级和纯化。最后,鉴定所得活性肽纯度及序列。结果表明酸性蛋白酶为最适蛋白酶,其水解最优条件为酶解温度45℃、底物质量浓度为30 g/L、酶添加量为2×104 U/g、水解时间为6 h。该条件下水解液DPPH自由基清除率达94.23%,水解度达33.52%。水解液经超滤和中压柱层析得最优组分UF-43,纯度达91.97%,其自由基清除能力较未分离的水解液提高约5倍。经高效液相串联二级质谱测定,其氨基酸序列为Phe-Gly-Ser-Val,分子质量为408 Da。因此,利用超滤联用中压柱层析技术可实现小分子活性肽分级和纯化。
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