电针干预对脑梗死大鼠脑组织Wnt信号通路的影响

作者:张晶晶; 杜元灏*; 李晶; 杨丽红; 陈林玲; 查庆平
来源:针刺研究, 2020, 45(03): 202-208.
DOI:10.13702/j.1000-0607.190024

摘要

目的:观察电针干预对脑梗死(CI)大鼠脑组织Wnt信号蛋白中7a(Wnt7a)、淋巴增强因子1(LEF1)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、Wnt信号通路内源性抑制剂Dickkopf-1(DKK1)mRNA及蛋白表达的影响,探讨电针治疗CI的作用机制。方法:将280只健康雄性Wistar大鼠随机分为电针组、模型组、假手术组和空白组,前3组每组90只,并按照术后1 h、3 h、6 h、9 h、12 h、24 h、3 d、7 d、12 d分为9个时相组,每组10只,空白组10只。采用改良的Longa法建立永久性大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型。电针组予电针刺激"水沟"穴,疏密波,2 Hz/15 Hz,2 mA,留针20 min,1、3、6、9、12、24 h时相组大鼠电针治疗1次,其余时相每日电针1次。采用神经损伤严重程度(NSS)评分于术前、术后及取材前对各组大鼠进行评价。采用实时荧光定量PCR法及Western blot法检测各组大鼠右侧缺血区脑组织Wnt7a、LEF1、GSK-3β及DKK1 mRNA和蛋白表达水平。结果:MCAO后,模型组及电针组大鼠NSS评分随缺血时间延长呈逐渐下降趋势;取材前,与假手术组比较,模型组大鼠各时相NSS评分明显升高(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠NSS评分在3、7、12 d时明显降低(P<0.05,P<0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠缺血区脑组织Wnt7a和LEF1 mRNA表达水平在3 h~12 d时均明显升高(P<0.01,P<0.05),GSK-3β和DKK1 mRNA表达水平分别在9~24 h和24 h~3 d时明显降低(P<0.05,P<0.01);模型组Wnt7a和LEF1蛋白表达水平在6 h~12 d均明显升高(P<0.05,P<0.01),GSK-3β和DKK1蛋白表达水平分别在24 h~3 d和3 d时明显降低(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠缺血区脑组织Wnt7a和LEF1 mRNA表达水平分别在12 h~3 d和24 h~12 d时明显升高(P<0.01,P<0.05),GSK-3β和DKK1 mRNA表达水平分别在9 h、3~12 d和12 h~3 d时明显降低(P<0.01,P<0.05);电针组Wnt7a和LEF1蛋白表达水平分别在24 h~12 d和3~12 d明显升高(P<0.05,P<0.01),GSK-3β和DKK1蛋白表达水平分别在12 h、7~12 d和24 h~12 d明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:电针干预能明显改善MCAO大鼠的神经功能损伤症状,可能与上调Wnt7a、LEF1及下调GSK-3β、DKK1的表达,进一步激活Wnt信号通路有关。

  • 单位
    天津中医药大学第一附属医院